【学位授予单位】：河北农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：S216.4
【目录】：
- 摘要4-5
- Abstract5-10
- 第一章 引言10-22
- 1.1 沼气研究与应用进展10-13
- 1.1.1 沼气发酵概念10
- 1.1.2 沼气发酵过程10-12
- 1.1.3 国外沼气应用进展12-13
- 1.1.4 国内沼气应用现状13
- 1.2 低温沼气技术研究进展13-14
- 1.2.1 合理的原料配比13-14
- 1.2.2 低温发酵添加剂14
- 1.2.3 沼气池保温和增温措施14
- 1.3 低温沼气微生物研究进展14-17
- 1.3.1 低温沼气微生物概述15-16
- 1.3.2 低温微生物的发酵机制16
- 1.3.3 传统分离培养方法16-17
- 1.3.4 现代分子生物学方法（非培养方法）17
- 1.4 变性梯度凝胶电泳（DGGE）17-20
- 1.4.1 技术原理18-19
- 1.4.2 PCR-DGGE 技术在微生物生态学中的应用19
- 1.4.3 PCR-DGGE 技术常见问题19-20
- 1.4.4 PCR-DGGE 图谱分析20
- 1.5 本研究的目的和意义20-21
- 1.6 研究技术路线21-22
- 第二章 耐低温沼气发酵优势菌系的筛选22-29
- 2.1 试验材料22-23
- 2.1.1 活性沼泥样品的采集22
- 2.1.2 试验装置22-23
- 2.1.3 主要试剂和仪器23
- 2.2 试验方法23-25
- 2.2.1 沼气发酵试验23-24
- 2.2.2 沼气发酵产气量的测定24
- 2.2.3 甲烷含量检测24-25
- 2.2.4 数据分析25
- 2.3 结果与分析25-28
- 2.3.1 不同接种源对总产气量的影响25-26
- 2.3.2 不同接种源对产气速率的影响26-27
- 2.3.3 不同接种源对甲烷含量的影响27-28
- 2.4 讨论28
- 2.5 小结28-29
- 第三章 沼泥总 DNA 的提取及 PCR 扩增条件的优化29-41
- 3.1 试验材料29-30
- 3.1.1 沼泥样品29
- 3.1.2 试剂29
- 3.1.3 仪器设备29-30
- 3.2 试验方法30-35
- 3.2.1 Protein K-CTAB 提取法30
- 3.2.2 溶菌酶提取法30-31
- 3.2.3 试剂盒提取法31-32
- 3.2.4 总 DNA 的测定32
- 3.2.5 PCR 扩增条件的优化32-35
- 3.2.6 PCR 扩增产物检测35
- 3.3 结果与分析35-39
- 3.3.1 沼泥总 DNA 的提取35-36
- 3.3.2 古菌 16S rDNA 扩增条件的优化36-39
- 3.4 讨论39-40
- 3.5 小结40-41
- 第四章 沼泥微生物菌群多样性分析41-54
- 4.1 试验材料41
- 4.1.1 试剂41
- 4.1.2 主要仪器设备41
- 4.2 试验方法41-48
- 4.2.1 沼泥中微生物 DNA 的提取41
- 4.2.2 古菌 16S rDNA 片段扩增41-42
- 4.2.3 古菌 16S rDNA V3 区片段扩增42-43
- 4.2.4 PCR 扩增产物的回收43
- 4.2.5 DGGE 方法的建立43-46
- 4.2.6 DGGE 图谱分析46
- 4.2.7 DGGE 图谱条带回收46
- 4.2.8 回收条带基因的克隆及测序46-48
- 4.3 结果与分析48-53
- 4.3.1 沼泥总 DNA 的提取48
- 4.3.2 古菌 16S rDNA 片段扩增48-50
- 4.3.3 DGGE 条件优化结果50-51
- 4.3.4 DGGE 指纹图谱分析51-52
- 4.3.5 优势条带的克隆测序52-53
- 4.4 讨论53
- 4.5 小结53-54
- 第五章 结论54-55
- 参考文献55-60
- 附录 实验相关溶液及试剂配制方法60-62
- 硕士期间发表学术论文62-63
- 作者简介63-64
- 致谢64-65
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