【学位授予单位】：安徽理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：X832
【目录】：
- 摘要5-6
- Abstract6-12
- 插图清单12-13
- 附表清单13-14
- 1. 绪论14-27
- 1.1 抗生素及其作用机制14-15
- 1.2 抗生素使用情况及影响15-16
- 1.3 细菌耐药性及抗生素抗性基因16-19
- 1.3.1 细菌耐药机制16-18
- 1.3.2 抗生素抗性基因18-19
- 1.4 ARGs在环境中的传播19-20
- 1.5 ARGs检测方法20-23
- 1.5.1 基于细菌培养的传统研究法20-21
- 1.5.2 采用现代分子生物技术法研究ARGs21-23
- 1.6 ARGs研究现状23-25
- 1.7 本论文的主要研究内容和意义25-27
- 2 实验材料与方法27-42
- 2.1 实验材料27-30
- 2.1.1 试剂与材料27
- 2.1.2 菌株与质粒27
- 2.1.3 酶类与PCR试剂27
- 2.1.4 仪器与设备27-28
- 2.1.5 试剂盒28
- 2.1.6 引物序列28-29
- 2.1.7 常用缓冲液和试剂29
- 2.1.8 培养基29-30
- 2.1.9 统计分析30
- 2.1.10 分析软件30
- 2.2 试验方法30-40
- 2.2.1 样品的采集30
- 2.2.2 样品的处理30
- 2.2.3 水样DNA的提取30-32
- 2.2.4 沉积物与污泥DNA的提取32
- 2.2.5 DNA纯化回收32
- 2.2.6 质粒DNA的提取32-33
- 2.2.7 DNA浓度纯度检测33
- 2.2.8 ARGs的PCR检测33-35
- 2.2.9 琼脂糖凝胶电泳35
- 2.2.10 ARGs质粒的制备35-36
- 2.2.11 基因拷贝数的计算36
- 2.2.12 ARGs定量PCR检测36-39
- 2.2.13 tet(W)克隆文库的构建及测序39-40
- 2.3 采样点布置40-42
- 3 结果与讨论42-58
- 3.1 样品DNA的提取结果42-44
- 3.1.1 沉积物与污泥DNA的提取42-43
- 3.1.2 水样DNA的提取43-44
- 3.2 ARGs的PCR检测结果44-51
- 3.3 ARGs的qPCR的定量结果51-55
- 3.4 tet(W)克隆文库分析55-58
- 4 结论58-59
- 参考文献59-66
- 致谢66-67
- 作者简介及读研期间主要科研成果67
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